凝血因子VIII的分离纯化技术项目

技术简介及特点：凝血因子Ⅷ是治疗血友病的救命药，目前由于原料血浆紧缺和分离纯化收率低等原因而一药难求，也造成了有些患者不治而亡。正常人血浆中的FVIII是以其和血管性假性血友病因子(von Willebrand Factor，vWF)形成的复合体形式存在，vWF作为FVIII的载体蛋白，在凝血过程中起到了非常重要的作用。而在现有的分离纯化过程特别是离子交换制备色谱中，大分子蛋白复合体容易解离，从而影响最终产品的活性；此外，FVIII的半衰期较短，而现有的离子交换制备色谱步骤操作时间较长，也容易造成其在制备色谱过程中失活。本项目建立了超大孔离子交换介质为核心的FVIII蛋白分离纯化工艺，超大孔介质的孔道尺寸可达600~800 nm，FVIII/vWF复合体蛋白可以快速、便利地进入介质孔道，从而实现高通量、快速分离纯化，同时最大限度地保护聚集体的天然结构，最终得到高活性的FVIII产品。FVIII蛋白的超大孔离子交换层析纯化工艺回收率达85%，比活达154 IU/mg蛋白，工艺稳定，易放大。
 
专利及进展情况：已申请分离纯化工艺的专利1项，《一种分离纯化凝血因子VIII的方法》，申请号：201210022202.7。

产业化前景分析：甲型血友病(Hemophilia A， HA)在世界范围内普遍存在，平均每5000个男性中就有1位HA患者。目前HA尚无法彻底治愈，只能通过输注新鲜血液或凝血因子VIII(FVIII)协助患者凝血。血液输注存在输注量大和病毒污染(艾滋病病毒、乙型肝炎病毒)等缺陷，已经逐渐被淘汰。输注重组FVIII产品可以有效地避免上述问题，在HA治疗方面取得了一定的效果。2007年，欧洲药品监管局(EMEA)发布信息称，根据已有的数据，并不能够预计和比较不同的重组凝血因子Ⅷ产生抗体的发生率。此外，重组FVIII产品还存在生产成本高、药物传递途经有限等不利因素，导致迄今为止仍然无法普及。在现阶段，HA的治疗仍主要依赖于从人血浆分离纯化得到的天然FVIII产品。我们目前的FVIII产品远远无法满足甲型血友病患者的需求。因此，本工艺产品具有广阔的应用前景，能够创造显著的经济效益。